第二代试管婴儿不能做哪些精子问题？

第二代试管婴儿不能做哪些精子问题？

做试管婴儿时，最怕的就是精卵不结合，即使常规检查精子数量和形态都是“正常”是的，有时受精失败，其中许多原因不明。近年来，越来越多的研究影响了受精。

第二代试管不能做哪些精子问题？

受精是指卵子和精子融合成合子，是试管受精辅助妊娠的关键环节。然而，意外受精失败，成为医生和不孕夫妇的头刺。大多数受精失败可以通过单精子卵胞浆注射（ICSI）技术，俗称第二代试管代试管受精来弥补怀孕。但仍有1%~3%的病例，即使使用第二代技术，所有卵母细胞仍不受精，导致试管受精颗粒无收获。大多数受精失败通常是精子因素，目前已经发现了许多由单基因变异引起的精子遗传缺陷。

01ICSI技术和正常受精

ICSI该技术主要适用于男性不育，如严重的弱精子症，或从附睾或睾丸中提取精子的无精子症，以及第一代试管受精技术（IVF）不受精或受精率低等。

胚胎学家通过选择活力和形态良好的精子，通过显微注射技术将精子注入卵母细胞，实现受精过程。卵母细胞通常在注射精子后16-18小时观察。如果形成双原核（雄原核和雌原核），双极体（第一极体和第二极体）被判定为正常受精;如果三原核（或多原核）和单原核被判定为异常受精;如果没有形成原核，则判断为受精失败。

精子注射到卵母细胞并不一定意味着受精，但也需要激活卵母细胞来完成正常受精。例如：精子就像钥匙，卵母细胞就像锁;钥匙插入锁孔后，必须旋转才能打开锁。“旋转”动作类似于卵母细胞激活。

现在已经明确，精子是通过关键因子特异性磷脂酶C(PLCζ)只有激活卵母细胞，才能完成受精，打开卵母细胞。

作为人体非常重要的信号分子，PLCζ核周鞘主要分布在精子顶体和核之间。精子注入卵细胞并发生顶体反应后，核周鞘暴露在卵浆中，溶解释放PLCζ，触发卵的钙离子振荡，然后启动卵母细胞激活受精。PLCζ表达和功能异常是各种遗传缺陷引起受精障碍的共同关键步骤。

02精子基因缺陷

导致受精失败的精子遗传缺陷主要有：

（1）PLCZ1基因变异直接导致基因变异PLCζ缺乏表达。国内外多篇文章报道。PLCZ1基因变异导致精子PLCζ缺失导致卵母细胞无法激活和受精失败;

（2）PICK1.SPACA1.SPATA16和DPY19L2等基因变异，导致经典的圆头精子症，精子顶体和核周鞘缺失。

（3）ACTL7A和ACTL9基因变异是核周鞘结构蛋白，导致精子顶体和核周鞘超微结构异常，从而影响核周鞘结构蛋白PLCζ定位并伴有表达量的下降。

近两年国内学者报道ACTL7A和ACTL许多由9基因变异引起的受精失败临床病例。这些遗传缺陷都会导致这些遗传缺陷。PLCζ缺失.表达异常.而活性下降，结果是受精失败。

03ICSI受精失败的处理措施

卵母细胞辅助激活（AOA）是人工模拟精子激活卵母细胞的过程，是公认的治疗方法ICSI受精失败的有效手段。AOA方法主要分为物理激活（电激活）和化学激活。

（1）物理激活（电激活）的原理是给卵母细胞一个短直流电压，在卵膜上形成许多可恢复的微孔。细胞外的钙离子可以通过微孔进入卵细胞，人工形成钙离子活卵母细胞。电激活需要特殊的电激活设备，安全性不能保证，目前国内临床应用较少。

(2)化学激活就是完成ICSI将注射的卵母细胞放入一定浓度的激活剂（如钙离子载体）中A23187.离子霉素ionomycin和氯化锶SrCl2等)，使卵母细胞钙离子水平升高，人为引起钙离子震荡，应用最为普遍。

目前认为AOA对胚胎发育和子代安全没有显著影响，但由于缺乏大规模的.前瞻性临床试验证明其安全性。在临床应用过程中，要严格把握其指征，避免扩大其应用范围。

04小结和展望

对于第二代试管受精失败的病例，通过精子形态学检测（识别圆头精子），观察精子超微结构（核周鞘超微结构异常）、精子免疫荧光和精子蛋白痕迹（证明）PLCζ是否缺失.表达异常等技术手段，以及遗传学基因检测(筛查)PLCZ1.ACTL7A.ACTL9等基因变异)有助于明确50%左右受精失败的原因。PLCζ相关检测可作为受精失败和不明原因不育的重要检测方法之一，可通过卵子激活技术帮助ICSI受精。